Phytomedicine：茯苓提取物通过调节脑肠肽、免疫、修复胃肠粘膜改善功能性消化不良

背景：茯苓在中国被用作食品和药物已有2000多年的历史，对功能性消化不良(FD)有很好的治疗效果。但其物质基础和作用机制尚未见报道。

目的：探讨茯苓及其三种提取物（三萜类，PCT；水溶性多糖，PCWP；酸性多糖，PCAP）对大鼠FD的治疗作用及其作用机制，以探索PC提取物治疗FD的活性物质，充分利用其医学价值。

方法：采用超高效液相色谱四极杆串联飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)和凝胶渗透色谱(GPC/SEC)对PC提取物的化学成分进行分析和定量。采用负重强迫游泳和隔日禁食42 d的方法建立FD大鼠模型，70只Wistar大鼠分为对照组、模型组、补中益气丸组、PCD组（茯苓水煎剂）、PCT组、PCWP组、PCAP组。治疗14天后，采用ELISA、组织病理学、免疫组织化学和Western blot等方法观察其作用及机制。

结果：共鉴定出77种三萜类化合物。PCWP主要由A组分(Mw: 3.831 ×107 Da)、B组分(Mw: 5.650 ×106 Da)和C组分(Mw: 113117 Da)组成。PCAP为均一组分，平均分子量为74320 Da。

PCT、PCWP和PCAP均能缓解FD症状。与对照组相比，模型组大鼠心、肾、肝、肺、胃和小肠脏器指数差异无统计学意义，脾脏和胸腺指数显著降低。与模型组相比，BZYQP、PCD和PCAP组血清D-xylose、ACh、ALB和TP水平均显著或极显著升高。

与模型组相比，PCD、PCT和PCWP显著提高GAS水平，BZYQP和PCD显著提高MTL水平，BZYQP、PCD和PCWP显著提高VIP水平，BZYQP、PCD、PCT和PCWP显著降低CCKAR和CGRP水平，显著提高SP水平，各提取物均能降低5-HT水平。免疫组织化学染色和Western blotting检测胃饥饿素在胃组织中的表达情况，PCD、PCT和PCAP均能增加胃饥饿素的表达。这些结果表明PC通过调节脑肠肽改善FD。

模型组大鼠胃和小肠组织的H&E染色显示胃上皮细胞坏死，脱落进入胃腔。肠上皮细胞坏死脱落进入肠腔，肠绒毛被破坏。在所有剂量组中，这些病理体征均显著改善。MUC2黏液可形成一个物理屏障，防止肠道微生物成分进入宿主。EGF和EGFR在胃粘膜的再生过程中发挥重要作用。免疫组织化学检测EGFR和MUC2，ELISA检测血清EGF。BZYQP、PCD、PCT和PCAP组胃EGFR表达水平显著升高，血清EGF水平在所有剂量组均显著升高，各剂量组肠道MUC2表达水平均显著升高。AQPs在胃生理中的功能可能涉及水转移及屏障功能，在PCT、PCWP和PCAP组胃AQP1表达显著下降。以上结果表明PC通过促进胃肠粘膜的修复改善FD。

FD与机体免疫相关，故检测相关免疫细胞因子和蛋白水平（TGF-β1， IL-1β， IL-2， IL-4， IL-6， IL-17， IFN-γ， TNF-α），结果表明PC通过提高免疫力改善FD。TLR和JNK信号通路在免疫和炎症中发挥着重要作用，TRAF6和c-Jun分别是这两种信号通路中的关键转录因子。免疫组化和WB结果显示p-c-Jun在PCD、PCT、PCWP和PCAP组表达下降，TRAF6在PCD、PCT、PCWP和PCAP组表达下降。

结论：PC提取物对FD大鼠有一定的治疗作用，其作用机制涉及多种途径。在传统应用中经常被忽略的PCAP是有效的。该研究为PC提取物的应用和开发提供了新的思路。

文献来源：

Tu, Y., Luo, X., Liu, D., et al. (2021). Extracts of Poria cocos improve functional dyspepsia via regulating brain-gut peptides, immunity and repairing of gastrointestinal mucosa. Phytomedicine : international journal of phytotherapy and phytopharmacology, 95, 153875. Advance online publication. https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153875