脑脊液细胞学检测是临床常用的检验项目之一,其对中枢神经系统疾病的诊断、鉴别诊断、指导临床治疗具有 重要意义。该文通过介绍脑脊液细胞学检验目的、标本采集、检验程序、报告模式、临床意义等内容,使其操作规范化、 标准化,更好地发挥临床检验价值。
1 检验目的
检查患者脑脊液中各种细胞数量、形态和比例 的变化,分析脑脊液细胞学反应类型,结合患者临 床表现、影像检查和实验室相关检查结果等综合分 析,做出细胞学诊断 , 为中枢神经系统疾病的诊断、 鉴别诊断、治疗效果和预后评估提供检验诊断依据。
2 标本采集
脑脊液标本主要通过腰椎穿刺术获得。为避免 或减少血液混入对脑脊液细胞计数及分类造成的影 响,一般采用第三管脑脊液用于细胞计数及细胞形 态学检查 [3-5],标本量不少于 2ml 为宜。推荐使用 腰穿包内带盖的无菌塑料试管作为采集容器,避免 使用真空采血试管或痰杯等容器送检。
3 标本送检
原则上,脑脊液标本采集后应立即送检,一般 不超过 1h ,室温保存。如标本不能及时送检, 可置 4 ~ 8℃冰箱暂时保存,2h 内送检。
4 标本接收
标本送达检验科后,工作人员核对标本相关信 息,检查采集容器是否符合要求,是否有渗漏,标 本量是否足够。 标本接收后应及时进行检验,久置可致细胞破 坏,影响细胞计数及分类;对于部分不合格标 本 ( 如标本容器选择错误、标本量小于 1ml、送检 不及时等情况),可执行让步接收和让步检验,及 时与临床进行沟通,并在报告单上备注说明标本状况对检验结果的影响。
5 检验程序
5.1 理学检查 包括脑脊液外观、透明度、球蛋白 定性等 。
5.2 细胞计数 包括细胞总数、有核细胞计数及红 细胞计数等,计数结果以 **×106 /L 单位报告 。
5.3 制片 推荐采用细胞玻片离心法进行细胞及其 他有形成分的收集。每次制片取混匀后的脑 脊液约 500μl(细胞数较多时,可适当减少用量), 离心速度 800r/min,离心时间 8 ~ 10min。试管离 心沉淀后取沉淀物涂片的方法不适用于脑脊液细胞 学检查。
5.4 染色 瑞 - 姫染色为脑脊液细胞形态学检验的 常规染色方法,必要时加做其它染色法,如 墨汁染色、革兰氏染色、抗酸染色、普鲁士蓝染色等。
5.5 阅片 低倍镜下快速浏览全片,结合常规细胞 计数结果,判断涂片细胞收集效果是否满意。如收 集效果不满意,应重新制片。低倍镜下观察有无异 常细胞或病原成分,发现异常成分时转油镜下进一 步确认和识别。
5.6 细胞分类 在油镜下进行有核细胞分类,结果 以 **% 形式表示。如全片有核细胞数不足 50 个, 可以“全片可见有核细胞多少个,其中 ** 细胞多 少个”的形式进行描述。
6 报告
细胞学报告推荐采用图文报告形式,内容包括 常规、细胞学和实验室提示三部分。
6.1 常规部分 包括颜色、透明度、球蛋白定性、 细胞总数、有核细胞计数、红细胞计数及有核细胞 分类等。
6.2 细胞学部分 包括图像和形态学描述。用图像 采集系统在镜下选择 2 ~ 4 幅有代表性的图片进行 报告。对细胞学表现进行必要的形态描述,包括细 胞分布、细胞大小、胞核大小、核形、核染色质特 点、核仁大小与数量、胞质颜色及内容物等。同时报告其他异常成分,如细菌、真菌及菌丝、寄生虫、 结晶等。
6.3 实验室提示 根据细胞学表现,结合患者临床 表现、影像检查及实验室检查相关结果综合分析, 向临床提供合理性提示和建议。
7 涂片保存
报告发出后,对涂片进行分类归档,妥善保管, 保存时限按各实验室标准操作规程进行处置,一般 保存 3 ~ 5 年。
8 生物安全防护
8.1 标本的采集、运送必须符合生物安全要求,防 止溢出。如标本溢出后,应立即对污染的环境和设 备进行消毒处理。
8.2 检验人员在处理标本时,需做好个人防护,严 格执行生物安全管理程序,对有明确传染性的标本 按级别进行防护。
8.3 废弃标本及其它相关的废弃物,严格执行医疗 废物处理流程。
9 临床意义
9.1 常见细胞及临床意义
9.1.1 红细胞: 正常脑脊液中不存在红细胞。脑脊 液中出现红细胞,见于各种原因引起的出血,如脑 出血(病理性)、蛛网膜下腔出血(病理性)及腰 穿损伤出血(非病理性)等。
9.1.2 淋巴细胞: 正常脑脊液中有少量的淋巴细 胞,约占有核细胞总数的 60% ~ 70%。受抗原刺 激后,淋巴细胞形态和功能可发生改变,按形态学 分为小淋巴细胞、大淋巴细胞、激活淋巴细胞等。
9.1.3 浆细胞:正常脑脊液中不存在浆细胞。浆细 胞的出现,提示体液免疫反应的存在。 9.1.4 单核细胞:正常脑脊液中有少量的单核细 胞,形态与外周血中单核细胞相似,约占有核细胞 总数的 30% ~ 40%,与淋巴细胞的比例为 4∶6 或 3∶7。疾病状态下,单核细胞受到抗原或各种理化 因素的刺激时,形态会发生变化,表现为胞体、胞 核增大,胞膜不规整,可有瘤状突起,胞质着色加深, 胞质出现多个空泡,称为激活单核细胞。
9.1.5 中性粒细胞:正常脑脊液中不存在中性粒细 胞,但外周血中的中性粒细胞可因腰椎穿刺损伤随 红细胞带入,应予识别。中性粒细胞的出现提示机 体存在炎症反应,常见于各种中枢神经系统感染, 无诊断特异性;也可见于颅脑外伤、颅脑术后、肿瘤、 脑出血、蛛网膜下腔出血等。
9.1.6 嗜酸性粒细胞:正常脑脊液中不存在嗜酸性 粒细胞。嗜酸性粒细胞的数量或比例明显增多时, 提示机体存在过敏反应或寄生虫感染的可能。
9.1.7 嗜碱性粒细胞:正常脑脊液中不存在嗜碱性粒细胞,它的出现提示存在过敏反应,可见于各种 炎症、异物反应、寄生虫感染等,无诊断特异性。
9.1.8 吞噬细胞:正常脑脊液中不存在吞噬细胞。 红细胞吞噬细胞、含铁血黄素吞噬细胞及胆红素吞 噬细胞的出现提示陈旧性出血。吞噬细胞吞噬功能 强大,可吞噬各种异物,包括变性的白细胞、吞噬 细胞和病原体等。
9.1.9 脱落细胞:各种原因导致脑室中的室管膜细 胞、脉络丛细胞及蛛网膜下腔中的蛛网膜细胞脱落 时,可在脑脊液中偶然发现,无诊断特异性。
9.1.10 肿瘤细胞:脑脊液中的肿瘤细胞来源于中 枢神经系统原发性肿瘤和继发性肿瘤。前者可见于 恶性程度较高的髓母细胞瘤、胶质瘤、生殖细胞瘤、 室管膜瘤和脑膜瘤等;后者常见于肺癌、乳腺癌、 黑色素瘤、胃癌、白血病及淋巴瘤等向中枢神经系 统转移。
9.2 常见细胞学表现及临床意义
9.2.1 正常脑脊液细胞学表现:外观呈无色透明, 白细胞数不高于 5×106 /L,由淋巴细胞和单核细胞 组成,两者比值为 7:3 或 6:4,细胞形态规整,无 明显的细胞激活表现。
9.2.2 淋巴细胞反应型:有核细胞计数可正常或显 著升高,镜下可见淋巴细胞比例明显增多,可见激 活淋巴细胞、浆细胞及少量单核细胞和中性粒细胞 等。临床意义:常见于病毒性脑膜炎,也可见于其 它中枢神经系统感染性疾病、免疫性疾病和肿瘤。
9.2.3 中性粒细胞反应型:有核细胞数中度至显著 升高,镜下可见大量的中性粒细胞,可伴少量淋巴 细胞、单核细胞或浆细胞,有时可见病原菌。临床 意义:提示急性炎性反应,见于细菌性脑膜炎、结 核性脑膜炎渗出期,也可见于脑出血、蛛网膜下腔 出血及颅脑手术后等非急性炎性反应。
9.2.4 嗜酸性粒细胞 - 浆细胞反应型:有核细胞数 可正常或轻中度升高,镜下可见嗜酸性粒细胞和浆 细胞比例明显升高,常伴少量淋巴细胞和单核细胞 等。临床意义:常见于脑寄生虫感染,也可见于结 核性脑膜炎、隐球菌性脑膜炎、颅脑手术后及蛛网 膜下腔出血病患者。
9.2.5 淋巴 - 单核细胞反应型:有核细胞数基本正 常或轻度增高,镜下可见少量淋巴细胞、单核细胞, 部分淋巴细胞及单核细胞可见激活表现。临床意义: 多见于疾病的恢复期,需与先前的细胞学表现进行 比较分析。
9.2.6 淋巴 - 中性粒细胞反应型:有核细胞数中度 至显著升高,镜下可见中性粒细胞及淋巴细胞明显 增多,偶见单核细胞或浆细胞等。临床意义:提示 炎性反应。多见于中枢神经系统细)菌感染治疗后、结核性脑膜炎、 真菌感染和颅脑术后等,需结合病史、患者临床症 状及体征和实验室相关检查结果综合考虑。
9.2.7 混合细胞反应型:有核细胞数中度至显著升 高,镜下可见中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等 多种细胞同时存在,以中性粒细胞和淋巴细胞为主, 也可伴少量浆细胞、嗜酸性粒细胞的出现。临床意义:提示炎性反应,与淋巴 - 中性粒细胞反应型临 床意义基本一致。多见于中枢神经系统细菌感染治 疗后、结核性脑膜炎、真菌感染和颅脑术后等,需 结合病史、患者临床症状及体征和实验室相关检查 结果综合考虑。部分结核性脑膜炎患者抗结核治疗 后,在相当长一段时间内细胞学可表现为混合细胞 反应型,这一特点对诊断结核性脑膜炎具有一定的 参考价值。
原始出处
脑脊液细胞形态学检验中国专家共识(2020).现代检验医学杂志. 第 35 卷 第6期 2020 年 11 月 J Mod Lab Med, Vol. 35, No. 6, Nove. 2020
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#专家共识#
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脑脊液中的白细胞正常范围不是0-8 ×10 6吗
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#中国专家共识#
74
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