J Ethnopharmacol：清心开窍方通过PI3K/Akt/GSK3β通路在体内外降低阿尔茨海默病Tau过度磷酸化

背景：阿尔茨海默病(AD)在中医中属于“老年性痴呆”范畴。AD与脑窍空虚或痰热阻络有关。出自《景岳全书》的“服蛮煎”，通过行滞气、开郁结、通神明、养正除邪来治疗痴呆。清心开窍方(QKF)由服蛮煎衍生而来，可有效治疗AD。阐明QKF对痰热相关AD的作用机制可能有助于治疗，但仍需要进一步的研究。

目的：旨在确定PI3K/Akt通路在AD中的作用，特别是所涉及的特异性效应蛋白，并通过调节PI3K/Akt信号，探讨QKF对AD的治疗作用。

方法：采用高效液相色谱-Q-轨道-质谱联用技术对QKF化学成分进行分析。随后，应用APP/PS1双转基因小鼠进行行为学实验，苏木精-伊红染色和尼氏染色评价QKF的神经保护作用和认知作用。

采用脑脊液药理学进行体外验证，采用A-β25-35诱导PC12细胞建立AD细胞模型。采用免疫组织化学、Western blotting、实时定量聚合酶链反应、形态学检测、CCK-8检测、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP镍端标记(TUNEL)染色等多种方法评价QKF对Tau过度磷酸化和抗凋亡的影响。这些方法还评估了QKF对PI3K/Akt/GSK3β通路mRNA和蛋白表达的影响。最后，使用抑制剂LY294002进行反向验证。

结果：从QKF水提物中鉴定出295种化学成分。QKF改善APP/PS1小鼠的空间认知和学习记忆，保护PC12细胞形态，提高细胞存活率，减少A-β25-35诱导的细胞凋亡，并通过PI3k/Akt/GSK3β信号通路抑制Tau蛋白的过度磷酸化。此外，LY294002在体外降低了QKF的这种保护作用。

结论：QKF可提高APP/PS1小鼠的空间认知、学习和记忆能力，并对PC12细胞有保护作用。体外和体内实验表明，通过PI3K/Akt/GSK3β通路降低AD中Tau过度磷酸化对AD有疗效。

原始出处：

Liu S, Xu L, Shen Y, Wang L, Lai X, Hu H. Qingxin Kaiqiao Fang decreases Tau hyperphosphorylation in Alzheimer's disease via the PI3K/Akt/GSK3β pathway in vitro and in vivo [published online ahead of print, 2023 Aug 12]. J Ethnopharmacol. 2023;117031. doi:10.1016/j.jep.2023.117031