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基因芯片标准化方法之Quantile

2016-05-27 MedSci MedSci原创

基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,就能通过荧光信号强度判断基因表达量的强弱。对基因芯片数据的标准化处理,主要目的是消除由于实验技术所导致的表达量的变化,并且使各个样本和平行实验的数据处于相同的水平,从而使我们可以得到具有

基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法,在一块基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时,就能通过荧光信号强度判断基因表达量的强弱。

对基因芯片数据的标准化处理,主要目的是消除由于实验技术所导致的表达量的变化,并且使各个样本和平行实验的数据处于相同的水平,从而使我们可以得到具有生物学意义的基因表达量的变化。




一般芯片的杂交实验很容易产生误差,所以经常一个样本要做 3~6 次的重复实验。因此,平行实验间的数据差异可以通过标准化处理去处掉,而常见的标准化方法之一就是Quantile,用户可以用R语言中的limma包来实现这一过程。


下面我们就来介绍一下其算法。其算法主要分为三步:

(1)对每张芯片的数据点排序。

(2)求出同一位置的几次重复实验数据的均值,并用该均值代替该位置的基因的表达量。

(3)将每个基因还原到本身的位置上。

假设我们现在有一个4X3的矩阵,分别代表A/B/C/D四个基因以及三个样本。

1、首先我们对每个样本的数据进行排序:


2、然后求出同一位置几次重复实验数据的均值:



3、用均值代替原来的表达量之后再还原到本来的位置:



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原始链接

https://en.wikipedia.org/wiki/Quantile_normalization

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