成纤维细胞现在可以用来静脉注射吗？

前几天澳洲的朋友问：小仙，日本那边说有一种最新的细胞技术，取自体一小块皮肤，培养后直接静脉注射，说是成纤维细胞，每次回输20-30亿，治疗效果比干细胞好，而且来源自体也安全，是这样吗？

小仙N连问：

直接静脉注射？

每次20-30亿？

真的是成纤维细胞吗？

为了治疗什么疾病还是单纯抗衰啊？

小仙的脑海中冒出的不良想法：那么大量成纤维细胞静脉，他们是多仇恨这个病人/客户啊，想人为的制造栓塞、纤维化甚至癌症。

小仙还是怀有一些小小的内疚，深感我们“干细胞者说”科普平台做的还不大，受众还不够多，不能惠及更多民众，让很多人总是被“新”技术迷惑。

我们科研技术人员有必要做一个全方位科普。但是每次辟谣的时候，我们都会有一种无力感。辟了一个谣，还会有千千万万个谣言等着大家。谣言真的是辟不完的，通常还会伪装成科普的形式出现。

今天，小仙又冒着被追杀的风险又写下了这篇科普文，和大家分享一下成纤维细胞的正确打开方式。

1 成纤维细胞到底是啥？

成纤维细胞是终末期细胞，不具备分化能力

1858年，德国病理学家Rudolf Virchow首次提出“结缔组织的纺锤形细胞”（Virchow, 1858）。

Ernst Ziegler首次提出了术语“成纤维细胞”，用来描述愈合后产生新结缔组织的细胞（Ziegler, 1895），观察到"célula fusiforme "或"fibro-células"是皮肤伤口愈合和疤痕中肉芽组织的重要生产者（Cajal, 1986）。1900年代开发的体外技术的出现促进了成纤维细胞的研究。培养来自胚胎鸡心脏外植体的初级成纤维细胞（Burrows and Neymann, 1917; Carrel, 1912; Ebeling, 1913; Hogue, 1919）。

50余年后，来自小鼠胚胎的3T3成纤维细胞系的建立（Todaro和Green，1963; Todaro等，1964）。培养的成纤维细胞多分化为骨、软骨和脂肪细胞的现象（Junker等人，2010）；

2 成纤维细胞的来源

了解一种细胞，得先了解它从哪里来。

1.耳后皮肤来源

皮肤中不同类型的成纤维细胞存在于其真皮层、真皮白色脂肪组织以及毛囊中。在皮肤发育过程中，一种常见的间充质祖细胞产生真皮成纤维细胞祖细胞，其进一步分化为乳头状和网状真皮成纤维细胞和毛囊相关成纤维细胞，以及真皮脂肪组织的脂肪细胞前体。

2.其他器官来源

器官内特异性成纤维细胞功能和谱系的存在是为了支持特定器官的发育、稳态和修复需要。这些细胞在胚胎发育过程中出现，因为多种细胞谱系汇聚形成成纤维细胞，这些成纤维细胞占据来自所有三个体细胞胚层的器官，例如外胚层来源的皮肤和乳腺、中胚层来源的骨骼肌或心肌以及内胚层来源的肺。

肺组织来源：肺不同的成纤维细胞与分支上皮、细支气管和脉管系统末端的肺泡相关联。在肺发育过程中，常见的心肺祖细胞产生多种成纤维细胞，包括胸膜间皮细胞、支持气体交换上皮的肺泡成纤维细胞、含脂滴的脂肪成纤维细胞、支气管周围和血管周围平滑肌细胞。

骨骼肌来源：骨骼肌成纤维细胞、成纤维脂肪前体细胞和周细胞位于肌纤维之间。几种发育上不同的胚胎间充质祖细胞产生成纤维脂肪前体，这些前体又作为肌肉相关成纤维细胞以及衰老和疾病状态下脂肪细胞的长期来源。

心肌组织来源：成纤维细胞和周细胞位于心肌细胞之间。在发育过程中，心脏成纤维细胞分别通过上皮-间质转化(EMT)和内皮-间质转化(EndMT)由心外膜和心内膜上皮细胞形成。

（参考：Fibroblasts: Origins, definitions, and functions in health and disease. Cell. JULY 22, 2021）

3 成纤维细胞在人体中有啥作用？

1. 成纤维细胞作为其他细胞或组织的支架，在组织损伤修复中起重要作用。

2. 成纤维细胞合成蛋白功能旺盛，因此在合成和调节细胞外基质成分中起重要作用。

3. 有较强的免疫抑制作用

4. 在炎症性疾病中，如类风湿性关节炎和炎症性肠病，成纤维细胞有多重作用：(a)作为炎症细胞和(b)招募白细胞、驱动血管生成、诱导组织慢性炎症。

4 成纤维细胞可以用在临床研究和应用哪些方面？

1.局部使用，主要集中在皮肤再生修复

尽管成纤维细胞存在修复哺乳动物损伤的强大机制，但它们通常最终导致纤维化，这带来了重大的临床挑战。

2011年6月22日获美国食品药品管理局(FDA)批准用于改善成人中重度鼻唇沟皱纹(laViv)

来源：耳后取约3~4平方毫米的皮肤

生产工厂：Fibrocell cGMP

培养时间：20天-30天

成品：2000万成纤维细胞（支架是透明质酸）

注射方式：局部注射

疗程设置：3-6周注射一次，3次为一个疗程。

2.静脉注射方向是免疫调节，如自免性疾病

查阅http://www.clinicaltrails.gov，目前能查到的所有临床研究和临床试验中只有一项是在墨西哥做的成纤维细胞治疗5名多发性硬化的临床研究（2020年启动，2021年结束）：

来源：耳后取约3~4平方毫米的皮肤，

培养时间：20天-30天

测试品：1亿成纤维细胞

注射方式：静脉注射

疗程设置：单次

5 成纤维细胞静脉注射的风险和思考点

1.如用于静脉注射存在的风险

1.1 促进肿瘤的发展和侵袭

21年发表在Cancer Cell Internationa杂志的一项研究（Downregulation of tumor‐derived exosomal miR-34c induces cancer‐associated fbroblast activation to promote cholangiocarcinoma progress）发现CCA细胞来源的外泌体中发现的miR-34c，通过直接靶向WNT1来抑制CAF的激活。研究发现在CCA中，miR-34c在外泌体中的表达减少，并促进肿瘤的进展。
  1.2  促进癌组织血管生长

19年发表在JOURNALOF HEPATOLOGY上的文章（Platelet-derived growth factor-D enables liver myofibroblasts topromote tumor lymphangiogenesis in cholangiocarcinoma）指出与肿瘤相关的新生血管生成主要涉及淋巴管而不是血管腔。CCA以血管内皮生长因子(VEGFs)和血管内皮生长因子受体(VEGFRs)的表达为特征，近年来被认为是CCA中肿瘤间质中血管内皮生长因子的主要细胞来源。肿瘤导管释放的PDGF-D吸引并激活肝成纤维细胞分泌VEGF-C/VEGF-A。淋巴管生成和淋巴侵袭是由肝肌成纤维细胞释放的VEGF-A/ c驱动。

1.3  主导进行性组织纤维化、破坏正常组织结构

2020年1月，多伦多大学的Boris Hinz与哈佛医学院的David Lagares在《Nature Review：Rheumatology》（联合发表了题为“Evasion of apoptosis by myofibroblasts: a hallmark of fibrotic diseases”的文章。该文章对近年来器官纤维化中成纤维细胞的功能进行了综述，认为肌成纤维细胞的持续激活是主导了进行性组织纤维化、破坏正常组织结构，从而导致器官功能丧失乃至死亡。

2.如用于静脉注射的一点思考点

2.1人皮肤来源成纤维细胞的取样大概是3-4平方毫米，培养周期是1个月，大概获得可使用的成纤维细胞约为6000万-1亿数量，体外培养时间过长会引起成纤维细胞老化，因此临床如静脉使用的数量会考虑细胞获取不易问题。

2.2人皮肤来源成纤维细胞属于终末分化细胞，不具备分化性，因此静脉回输的临床意义主要是免疫调（适合自身免疫性疾病），而且存在未知的促癌和纤维化风险，因此要充分考虑静脉使用的得失。

2.3人皮肤来源的成纤维细胞即使要进行静脉回输，没有药效比研究，也没有安全剂量研究可以参考，如参考干细胞的安全剂量，不会超过2亿个/每次。