BMC Oral Health：HPV相关p16INK4A和HSV在口腔黏膜良性和潜在恶性病变中的作用

口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma, OSCC)是一种由多种因素引起的疾病，其中被证实和讨论最多的是吸烟和饮酒。此外，正如最近国际癌症研究机构题为“国际癌症研究机构对口腔癌预防的看法”的特别报告所述，全世界大约只有2%的口腔癌是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的，主要是HPV16型。事实上，高风险的人乳头瘤病毒(HR-HPV) 16型和18型在潜在的恶性病变和鳞状细胞癌中最为普遍。另一方面，低风险类型与口腔鳞状上皮相关，如寻常疣(2,4亚型)，鳞状乳头状瘤(6,11亚型)，morbus Heck(13,32亚型)，尖锐湿疣(HPV亚型6,11)。

广泛用于筛查HPV存在的替代标记物是p16^INK4A蛋白，有时被称为p16，它在HR-HPV亚型相关的前体病变中过表达。有报道称，在肿瘤组织中，HPV感染与p16^INK4A蛋白表达有关。HPV参与潜在致癌的分子机制是基于抑制Rb，通过负反馈调控导致p16^INK4A蛋白高表达。在口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell carcinoma, oscc)中，p16^INK4A的过表达与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中常见的p16^INK4A过表达相同。然而，据Rosa等人报道，评估p16^INK4A在口腔潜在恶性疾病(OPMDs)中的表达的研究结果存在矛盾，这可能是由于所涉及的机制的复杂性，然而p16^INK4A的过表达表明HPV感染。HSV-1是一种共存于口腔的嗜上皮性人类病原体，可能影响一半的人群，一旦感染细胞，它就会潜伏在周围神经的感觉神经节中，并在应激的作用下被重新激活。这一过程可能导致口腔上皮细胞继发感染。在感染区，它具有嗜神经亲和性，复制周期快，可通过皮肤或粘膜，在分娩时，通过被感染的体液(唾液、生殖器液、活动性病变的渗出液)传播，引起大多数口面部和中枢神经系统的原发性感染。

HPV和HSV-1同时存在对口腔癌风险的影响已经被一些流行病学研究调查了很长时间，但结果不一致。HPV和HSV感染的患病率及其与炎症和OPMDs的关系尚不确定。根据WHO的分类，口腔扁平苔藓(OLP)和口腔白斑(OL)构成了opmd的一部分。虽然导致最常见的OPMD -白斑-进展为OSCC的病因和危险因素是吸烟和咀嚼烟草，但对于口腔扁平苔藓作为一种慢性t细胞介导的自身免疫性疾病，这方面的研究仍在进行中。被命名的一些因素包括遗传背景、引起潜在地衣样物质反应的牙科材料类型(如汞合金、金属、金和复合修复体)、患者服用的药物(如心血管药物、非甾体抗炎药、降糖药)、感染因子如HSV和HPV。在提到OLP与这两种病毒的关系时，最近的一篇系统综述提出了与HPV的有趣关系。作者认为，HPV感染可能是细胞毒性t淋巴细胞扩增的抗原刺激，而细胞毒性t淋巴细胞扩增是严重侵蚀性OLP的特征。一项研究虽然在少数受试者中进行，但研究表明，考虑到可能的“肇事逃逸”机制，HSV-1型和HPV-16型在口腔癌的发展中发挥协同作用，强调HSV可能在opmd中比在癌中更常见。

p16^INK4A作为一种可能的HPV和HSV蛋白的替代标记物在口腔，特别是在opmd中共同表达，这是一个目前文献中没有足够重视的研究问题。然而，越来越多的证据表明，p16^INK4A过表达并不能明确地代表HPV在这些疾病中的活性转录，这强调了与细胞周期和分子途径相关的其他机制可能会促进p16^INK4A的阳性免疫组织化学染色。由于HSV和HPV感染是全球负担，本研究的目的是确定p16^INK4A替代标志物在不同临床和组织病理学诊断的活检中HPV和HSV的患病率，取材于不同的口腔粘膜部位，其中包括OPMD。

方法：对211例患者的211例福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)块进行免疫化学分析。临床诊断为口腔扁平苔藓(30例)、口腔白斑(13例)、粘膜膨出(25例)、黏膜糜烂/溃疡/炎症(8例)、黏膜过度生长(135例)。

p16^INK4A和HSV表达的分布及类型与受试者年龄、性别的关系

HPV p16^INK4A蛋白与HSV表达的相关性

p16^INK4A和HSV的表达与口腔部位有关

p16^INK4A和HSV表达与临床诊断的关系

p16^INK4A和HSV检测与组织病理学诊断的关系

p16^INK4A和HSV检测与组织病理学诊断的关系综述

OLP和OL病例中p16INK4A的代表性免疫染色和HSV的存在。OLP上皮细胞可见p16INK4A免疫染色;高比例的OL组织中可见B p16INK4A免疫染色;C p16INK4A蛋白表达OLP;dhsv在OLP组织中的表达;E - HSV在OL中的表达;F HSV蛋白表达OLP (EnVision技术)。该比例尺参照0.2毫米的实际尺寸

A为口腔黏膜上皮细胞苏木精和伊红切片，B为HSV蛋白表达的代表性免疫染色，呈中等强度的弥漫性模式。该比例尺参照0.2毫米的实际尺寸

A OLP上皮细胞可见苏木精和伊红玻片;B p16INK4A蛋白表达的代表性免疫染色，代表OLP中中等强度的弥漫性模式。该比例尺参照0.2毫米的实际尺寸

结果：11例FFPE患者中位年龄58.5岁(平均年龄54.0岁，SD±17岁)。男女比例为2.3(分别为69.7%和30.3%)。所有HSV阳性样本均表达p16^INK4A(p = 0.000)，与临床诊断的多样性有不同程度的相关性，其中OM阳性样本为49.1%(29例)，OLP阳性样本为30.5%(18例)。p16^INK4A与OLP的相关性为30.5%(18)，与纤维瘤的相关性为30.5%。HSV主要在纤维瘤中表达，占47.6%(10例阳性)。

结论：HSV和p16^INK4A阳性与活检诊断相关，p16^INK4A在OLP和纤维瘤中最常见。p16^INK4A和HSV在口腔粘膜黏液囊肿和纤维瘤中共表达的结果表明，这两种病毒诱导的分子改变是协同的。p16^INK4A阳性的鳞状乳头状瘤样本也对HSV呈阳性，这表明假定的HSV促癌作用可能是一个早期事件。

原文出处：Duś-Ilnicka I,  Hałoń A,  Perra A, HPV related p16 and HSV in benign and potentially malignant oral mucosa pathologies.BMC Oral Health 2024 Mar 18;24(1)