专家解读，一文读懂肺真菌病的诊断进展！
2018-07-14 李华茵 LL 医学界呼吸频道
侵袭性真菌感染已经变得越来越常见，第一时间确诊是整个肺真菌病诊疗过程中的重点，那么如何才能快速诊断呢？
目前，肺真菌病患病率不断上升，李华茵教授推断，可能与易感染群的增加、检测或诊断技术提高、接触真菌机会增加等因素相关，因此，肺真菌病的诊断尤为重要。
1肺真菌病的诊断方法
首先，李华茵教授回顾了主要致病性下呼吸道真菌种类：
而目前，肺部真菌感染的诊断项目包括宿主、影像学、组织病理学和微生物学等，涂片与培养、抗原检测、分子生物学方法、侧向层析法（LFD）、吹气实验是目前主要的微生物学检测方法，李华茵教授对各个诊断项目做了举例与解释。
■ 宿主
肺部感染危险因素不同，易感病原体也不同。
■ 影像学
肺真菌病在CT上的表现如下：
气腔小结节：指6-10mm的小结节，通常反映细支气管周围实变，因此呈气腔小结节：指直径6-10mm的小结节，通常反映细支气管周围 实变，因此呈现小叶中央性分布。有时其周围伴随晕影（hallo），呈毛玻璃样密度减低，常是血管侵袭性肺曲霉比较特征的表现，但亦可见于非结核分枝杆菌肺病，毛霉菌、念珠菌、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒感染，韦格纳肉芽肿，kaposi肉瘤和出血性转移。
毛玻璃样阴影：指原有肺血管结构变得模糊不清的云雾状阴影，见于各种间质和气腔病变。以肺孢子菌病和巨细胞病毒肺炎最具代表性，亦见于非感染性疾病。
树芽征（tree-in-bud pattern）：一种仅在HRCT才能显示的感染性细支气管炎的征象，由小叶中央性分枝的小管和小结节组成，反映细支气管炎症和管腔被炎症分泌物或粘液填塞。见于细菌、分枝杆菌、真菌和病毒感染。
气腔实变：指局部性肺衰减增加而原有肺血管结构变得模糊不清。见于细菌、真菌和病毒感染。分枝杆菌的肺实质感染也可以表现斑片状小结节样的气腔实变，伴或不伴空洞形成。
2真菌诊断在微生物实验室的应用
真菌感染的实验室诊断主要包括真菌涂片、培养、鉴定、药敏试验、血清学鉴定等，李华茵教授选择临床重点实验室方法进行了详细讲解。
■ 涂片
革兰染色： 所有真菌、放线菌均为革兰阳性，被染成蓝黑色。适用于酵母菌、孢子丝菌、组织胞浆菌及诺卡菌、放线菌。
墨汁染色：印度墨汁或中国墨汁不能使隐球菌荚膜多糖着色，但可提供黑色背景从而使荚膜更亮而易于观察。CSF墨汁染色发现圆形厚壁孢子，有出芽、荚膜，提示隐球菌感染。同时李华茵教授强调，不主张用墨汁染色作为脑脊液中隐球菌的常规检测方法。
■ 培养
李华茵教授介绍，分生孢子头与足细胞是曲霉的特征性结构，因此培养镜检后可有效诊断。
不同颜色培养基也具有诊断意义，例如咖啡酸琼脂培养基中新生隐球菌3天内产生棕色，而其他酵母及酵母样菌不产生棕色。
对于马尔尼菲蓝状菌来说，不同温度培养下形态不同是它的主要特点。它是蓝状菌属中唯一的温度依赖性双相真菌：即37℃培养时为酵母（组织相），25℃培养时为霉菌（菌丝相），自然界中以菌丝形式存在，在组织中可形成小的圆形的或椭圆形细胞。
■ 血清学检测
G试验是临床上较为常见的检测方法，根据相关试验结果证实，连续2次或2次以上的G试验阳性，可提高特异性与阳性预测值，在确诊与拟诊真菌感染方面，平均比出现临床症状和体征早10天，阳性患者中70%比临床表现早3天。
同时，G试验对于诊断卡氏肺孢子虫肺炎准确性高于真菌感染，敏感性很高，可作为卡氏肺孢子虫肺炎的筛查工具。
而另一位关键先生则是“GM试验”，它作为诊断侵袭性曲霉感染的重要检测手段，具有早期、快速、高特异性的特点，GM水平可反应曲霉负荷量，血清检测推荐用于恶性血液肿瘤、造血干细胞移植患者，IPA推荐同时检测BAL和血清样本，其动态变化能够指导抗真菌药物的使用。
李华茵教授同时强调，三唑类抗真菌药的使用可能导致假阴性。
3目前可以尝试的新技术
■ 侧向分析法（LFD）
■ 吹气试验
■ MALDT-TOF技术
■ 荧光定量PCR
■ 二代测序
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