肺动脉高压患者细胞外囊中的MircoRNA改变了内皮的血管生成反应

肺动脉高压（PAH）是一种罕见，进行性的心肺疾病，其特点是血管内皮细胞和平滑肌细胞过度增生、炎症和纤维化，导致右心衰竭和过早死亡。PAH的复杂分子机制尚未完全了解，包括常见的和罕见的遗传变异以及microRNAs失调的影响。在分子水平上，肺动脉中的各种细胞类型参与了PAH的重塑事件，影响肺血管壁的病理表现。缺氧状态、炎症、血管损伤和氧化应激都有助于重塑过程。尽管现代肺动脉高压专项治疗取得了进展，但PAH患者的死亡率仍然很高，在22.2%和54.5%之间。近来，人们对PAH的发展最追求的机制之一是细胞外囊泡（EVs）的作用。PAH患者循环中的EVs增加，EVs的数量与肺血管阻力、功能损害和死亡率相关。EVs是细胞间交流的重要媒介，携带生物分子，如蛋白质、DNA、信使RNA和miRs。EVs可以作为心血管疾病的积极或消极调节剂，这取决于其来源的细胞的类型和状态。

MiRs是在组织、血浆和EVs中发现的小的、非编码的RNA分子。在细胞外小体中，miRs根据其序列中存在的特定图案被不同地分到外泌体中。它们在PAH中失调，在动物模型中对疾病过程有贡献。在PAH患者中发现的miRs是否是PAH的正向或负向调节剂，目前是一个研究课题。然而，随着越来越多的miRs被发现调控生物过程，确定它们在疾病进展中的分子功能是具有挑战性的。在这项研究中，我们确定了与PAH患者血浆来源的EVs相关的miRs，并解读了它们对参与PAH致病性的细胞的功能影响。我们评估了与健康人相比，PAH血浆中EVs的miRs表达，并探讨了在PAH中高度改变的选定miRs对人类肺动脉内皮细胞的功能影响。

研究目的：该研究旨在评估与健康对照组（HC）相比，来自PAH患者血浆的纯化EVs中所包含的miR谱。

研究方法及结果：

使用流式细胞仪、Western blot和电子显微镜对从无血小板血浆中纯化的循环EVs进行了分析。使用GeneChip miRNA 4.0阵列和生物信息学工具对从EVs中分离的总RNA进行了微阵列分析。在人肺动脉内皮细胞（hPAECs）中进行miRs的过量表达和抑制，这些细胞之前被PAH-或HC衍生的EVs培养过。

在hPAECs中测试了细胞增殖（MTT试验）和血管生成（管形成试验）以确定miR功能。在比较PAH和HC组时，MiR分析显示了370个热，其中22个被发现在PAH EVs中被下调，6个被上调。在改变的miRs中，miR-486-5p被过度表达，而miR-26a-5p在PAH EVs中与HC EVs相比则被下调。抑制mir-486-5p或过量表达miR-26a-5p在hPAECs中暴露于PAH EVs后，与HC EVs相比，PAH EVs造成的促血管生成和增殖效应被废除了。来自PAH EVs的miRs的血管生成和增殖作用被观察到是通过核因子（NF）-κB激活介导的。PAH EVs携带并呈现出一种改变的miR谱，可以被用来限制血管生成并减少肺内皮的激活。进一步研究PAH患者循环异质性EVs的miRs，以了解它们作为PAH治疗目标的潜力。

参考文献：

Khandagale A, Corcoran P, Nikpour M, Isaksson A, Wikström G, Siegbahn A, Christersson C. MircoRNA in Extracellular Vesicles from Patients with Pulmonary Arterial Hypertension Alters Endothelial Angiogenic Response. Int J Mol Sci. 2022 Oct 8;23(19):11964. doi: 10.3390/ijms231911964. PMID: 36233263.